特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　AR,98%　畫眉草彎孢　5g

L1-細(xì)胞粘附分子(L1CAM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　殼菌　1g

天冬酰胺合成酶(ASNS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　枯草芽胞桿菌　250mg

白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制因子(LEI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　紫紅曲霉　5g

蛋白酪氨酸酸酶受體G(PTPRG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　pBlueScript SK(+)　25ml

興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(EAAT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　馬賽菌屬　5ml

驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員5A(KIF5A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　狹霉素鏈霉菌　100g

驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員18A(KIF18A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　冷溫木拉克酵母　25g

G蛋白偶聯(lián)雌激素受體1(GPER)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　松口蘑　100g

Bcl2相關(guān)髓細(xì)胞白血病序列1(MCL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　大豆慢生根瘤菌　25g

IgG-Fc片段結(jié)合蛋白(FcγBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　腸球菌屬　500g

序列相似家族132成員A(FAM132A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　泡盛曲霉　25g

形成素結(jié)合蛋白1(FNBP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　泡菜大洋芽胞桿菌　5g

肌脂蛋白(SLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　假單胞菌　250mg

D-多巴色素變位酶(DDT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　秀珍菇　1g

歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黑曲霉　250mg

鈣網(wǎng)蛋白(CRT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　　氣微菌　1g

鈣腔蛋白(CALU)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　枯草芽孢桿菌　25g
彭氏變形菌探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒松果體N甲基酰羥色抗體CASP4(Caspase-4)  半胱酸蛋白酶蛋白-4抗原1 ml

短鏈脫氫還原酶1抗體Trk B  神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）5 ml

DNAJC7蛋白抗體Trk B  神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）1 Kit

動(dòng)力結(jié)合蛋白DNMBP抗體Trk C  神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）1 ml

白喉酰生物合成樣蛋白2抗體TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT)  促甲狀腺素受體（抗原）100 ul

Notch信號(hào)通路Delta樣配體3抗體Caspase-8 (pro Mch5)  半胱氨酸蛋白酶8抗原1 ml

動(dòng)力蛋白激活蛋白2抗體TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT)  促甲狀腺素受體（抗原）5 ml

視神經(jīng)細(xì)胞相關(guān)蛋白/早老素結(jié)合蛋白抗體TY3H ( Tyrosine Hydroxylase )  酪氨酸羥化酶（抗原）1 ml

DHX螺旋酶抗體Tubulin-Alpha  微管蛋白（抗原）1 Kit