PCR-熒光探針?lè)?/strong>是一種在PCR反應(yīng)中利用特定熒光探針實(shí)現(xiàn)等量擴(kuò)增和實(shí)時(shí)檢測(cè)的方法,其具有以下特點(diǎn):
1、高靈敏度:可以檢測(cè)到非常低濃度的靶分子,其靈敏度可以達(dá)到單個(gè)分子的水平,對(duì)樣本的檢測(cè)結(jié)果也非常準(zhǔn)確。
2、高特異性:熒光探針的設(shè)計(jì)可以使其只與目標(biāo)DNA序列的特定區(qū)域結(jié)合,并且將靶標(biāo)和非靶標(biāo)分子之間的差異擴(kuò)大,從而減少假陽(yáng)性率。
3、實(shí)時(shí)檢測(cè):熒光探針?lè)ǖ膶?shí)時(shí)檢測(cè)方式可以在PCR反應(yīng)過(guò)程中監(jiān)測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的積累,有效提高了分析速度和靈敏度。
4、多重檢測(cè):可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列,從而大大提高了檢測(cè)效率和結(jié)果的可靠性,并且可以同時(shí)檢測(cè)不同的細(xì)菌菌種等。
5、可定量檢測(cè):熒光信號(hào)的強(qiáng)度與產(chǎn)物的數(shù)量成正比,可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線法將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的分子數(shù),實(shí)現(xiàn)數(shù)量級(jí)定量檢測(cè)。
6、操作簡(jiǎn)便:不需要任何吸光度檢測(cè)、凝膠電泳等步驟,只需要添加熒光探針和引物,將反應(yīng)體系加熱到合適的溫度后,直接進(jìn)行PCR反應(yīng)即可。
總之,PCR-熒光探針?lè)?/strong>的特點(diǎn)是高靈敏度、高特異性、實(shí)時(shí)檢測(cè)、多重檢測(cè)、可定量檢測(cè)以及操作簡(jiǎn)便等,這些優(yōu)勢(shì)使得該方法在分子生物學(xué)、臨床診斷、食品安全檢測(cè)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。