簡述牛雌二醇ELISA 試劑盒內(nèi)容及配制 試驗(yàn)原理： Estradiol試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知Estradiol濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將Estradiol和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。Estradiol的濃度呈比例關(guān)系。 顏色的深淺和樣品中
試劑盒內(nèi)容及其配制：
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| 96孔配置 | 48孔配置 | | 96/48人份酶標(biāo)板 | 1塊板（96T） | 半塊（48T） | | 塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | | 標(biāo)準(zhǔn)品：400pmol/L | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） | | 空白對照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） | | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 | 1瓶（8.0ml） | 1瓶（4.0ml） | | 生物素標(biāo)記的抗Estradiol抗體 | 1瓶（8.0ml） | 1瓶（4.0ml） | | 親和鏈酶素-HRP | 1瓶（12ml） | 1瓶（6.0ml） | | 洗滌緩沖液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（10ml） | | 底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | | 底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | | 終止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
自備材料：
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。 4． 安全性：
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。牛雌二醇ELISA 試劑盒
2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
試劑的準(zhǔn)備：
1． 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：
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pmol/L | （6號標(biāo)準(zhǔn)品） | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 | | 200 pmol/L | （5號標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | | 100 pmol/L | （4號標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | | 50 pmol/L | （3號標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | | 25 pmol/L | （2號標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | | 12.5 pmol/L | （1號標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | | 0 pmol/L | （空白對照） | 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
試劑盒性能：
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。牛雌二醇ELISA 試劑盒
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。 |
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